SDS PAGE a gelová elektroforéza

SDS PAGE vs gelová elektroforéza

Elektroforéza může být použita k zjištění hmotnosti objektu obvykle pro protein a deoxyribonukleovou kyselinu (DNA). Pásmo DNA, když je zavedeno do chemikálií, může urychlit nebo zpomalit informační proces. DNA markery známé hmotnosti se používají k přibližné velikosti objektů pohybujících se po ukončení elektroforézy. Elektroforéza je s největší pravděpodobností nejpoužívanějším nástrojem pro molekulární biology a biochemisty.

Existují dva typy elektroforézy, které se v tomto procesu běžně používají. Jedná se o elektroforézu na bázi dodecylsulfátového polyakrylamidového gelu (SDS-PAGE) a přirozené gelové elektroforézy.

SDS-PAGE je neselektivní metoda gelové elektroforézy používaná v oblastech jako je: biochemie, forenzní, biologie a genetika k oddělení proteinu od elektroforetické mobility. SDS je aniontová povrchově aktivní látka, která může být použita k pomoci při lýze buněk během extrakce DNA a při separaci proteinů v SDS-PAGE. Během elektroforézy se nejprve zkapaluje směs proteinu v roztoku SDS. Poté se na odstranění disulfidových vazeb aplikuje látka nazvaná Mercaptoethanol, aby byl bílkovina lineární. Potom se zahájí elektroforéza. Výsledky by poskytly dva zbytky molekul, z nichž jeden je SDS-PAGE.

Absence SDS-PAGE není záležitostí, jelikož gelová elektroforéza může být ještě provedena pouze tehdy, že proteiny neztratí celou svou sekundární a terciární strukturu a neotevřejí se do obecně rovných tyčí.

Mezitím přirozená gelová elektroforéza používá gel jako antikoncepční médium. Obvykle se používá k oddělení biologických makromolekul, jako je DNA, ribonukleová kyselina (RNA) a protein. Může být také použit pro separaci nanočástic.

Existují dva hlavní gely používané při nativní gelové elektroforéze, a to:

Agarózový gel, který se používá pro větší molekuly. Tento gel neidentifikuje malé rozdíly mezi dvěma molekulovými pásmy. Používá se také pouze k oddělení DNA. Vizualizace agarózového gelu se provádí za použití směsi ethidiumbromidu.

Polyakrylamidový gel, který se používá pro menší molekuly. Tento gel identifikuje rozdíly mezi molekulárními pásmy. Kromě DNA může také oddělit proteiny.

Souhrn:

1.SDS-PAGE je neselektivní metoda gelové elektroforézy používaná v oblastech jako je: biochemie, forenzní, biologie a genetika k oddělení proteinu od elektroforetické mobility, zatímco gelová elektroforéza se obvykle používá k oddělení biologických makromolekul, jako je DNA, ribonukleové kyseliny (RNA) a bílkoviny. Může být také použit pro separaci nanočástic.

2. Natální gelová elektroforéza má dva typy: agarózový gel a polyakrylamidový gel.